Хроничната миелоидна левкемия е малигнено заболяване на хемопоетичните стволови клетки. Произходът на заболяването се дължи на хромозомна транслокация между хромозоми 9 и 22 - t(9;22)(q34;q11), в резултат на което се образуват една по-дълга хромозома 9 и по-къса хромозома 22, наречена Филаделфийска хромозома (Philadelphia chromosome).
В резултат на обмяната на хромозомни фрагменти BCR генът от хромозома 22 се оказва свързан физически с ABL1 гена, намиращ се върху фрагмента от хромозома 9. Полученият фузионен ген – BCR-ABL1 кодира протеин с конститутивна тирозин киназна активност, коeто води до неконтролируемо делене на хемопоетичните стволови клетки.
Наличието на BCR-ABL1 фузия е отличителна характеристика за Хронична миелоидна левкемия
Количествено определяне на BCR-ABL1 транскриптите се провежда при първоначалната диагноза на хронична миелоидна левкемия и периодично на всеки 3 месеца след започване на лечението с тирозин киназни инхибитори.
Измерване на BCR-ABL1 транскриптите има важно значение за стратегията на лечение и вземането на решение за възможността за прекратяване на лечението.
Мониторинг на нивата на BCR-ABL1 продължава да се провежда периодично и след спиране на лечението в съответствие с международните препоръки и ръководства за поведение при пациенти с хронична миелоидна левкемия.
Стойностите на BCR-ABL1 транскриптите се изразяват в проценти (%) по международната скала (International Scale - IS)
IS е важен критерий за оценка на състоянието на заболяването и ефекта от лечението. European LeukemiaNet (ELN) препоръчва потвърждаване на IS чрез количествен PCR веднъж на всеки 3 месеца след започване на лечение с тирозин киназни инхибитори - TKI (Tyrosine Kinase Inhibitors).
Проследяване на нивата на BCR-ABL1 транскриптите е необходимо да се извършва с количествен диагностичен тест, валидиран да измерва нивата на молекулярния отговор по международната скала (International Scale-IS) с чувствителност поне MR4.5 или BCR-ABL1 (IS) ≤ 0.0032%.
Настоящите терапевтични стратегии при пациенти с хронична миелоидна левкемия целят достигане на траен и дълбок молекулярен отговор и ремисия без прилагане на лечение (Treatment-free remission - TFR). Дълбок молекулярен отговор (Deep Molecular Response - DMR) отговаря на нива на транскриптите MR4.0 (BCR-ABL1/ABL1 ≤ 0.01% IS) или MR4.5 (BCR-ABL1/ABL1 ≤ 0.0032% IS).
За да се осигури надеждна детекция на транскрипти с толкова ниска честота е необходимо използването на високочувствителни методи, които могат да осигурят детекция и околичествяване на транскриптите с висока достоверност дори под посочения праг.
Революционна дигитална PCR технология осигурява количествено определяне на BCR-ABL1 транскриптите с висока точност и чувствителност
LOAA™ dPCR (Lab On An Array) е система за дигитален PCR, разработена от иновативната южнокорейска диагностична компания OPTOLANE Technologies Inc. Диагностиката и мониторинга на хронична миелоидна левкемия е част от разработените и валидирани решения за системата, които могат да бъдат използвани за целите на ин витро диагностиката.
LOAA™ dPCR осигурява детекция и количествено определяне на BCR-ABL1 транскрипти с висока прецизност и чувствителност до 0.0025 %IS (MR 4.6).
Защо LOAA™ dPCR се характеризира с по-висока чувствителност и точност на анализа?
Принципът на дигиталния PCR се състои в това да се раздели PCR реакцията на хиляди отделни PCR реакции, всяка от които се осъществява в отделна наноямка.
Целта е пробата да се разреди многократно, така че в отделните наноямки да попадне само 1 копие от изследвания таргет или 0.
След това системата отчита и преброява положителните и отрицателните наноямки и предоставя информация за абсолютния брой копия на изследваните геномни таргети. Колкото по-голям е броят на тези наноямки, толкова по-висока е чувствителността на детекция и прецизността на количественото определяне.
LOAA™ dPCR позволява количествено определяне без използването на количествени стандарти
При количественото определяне на BCR-ABL1 чрез Real-Time PCR е необходимо да се използват всеки пък количествени стандарти. Освен това информацията за концентрация на пробата е винаги относителна. Информация за точния брой копия в първоначалния материал не може да бъде получена.
LOAA™ dPCR дигитализира PCR процеса, което позволява абсолютното и точно количествено определяне на броя копия в първоначалния изходен материал без да е необходимо използването на стандарти в процеса.
Повече информация за LOAA™ dPCR, може да откриете ТУК