RIDASCREEN® Gliadin competitive е ELISA тест кит за анализ на ферментирали и хидролизирани храни (напр. бира, нишестен сироп, нишесте, малцов екстракт, квас, соев сос), които са обявени като „безглутенови”.
Конкурентният ензимен имуноанализ измерва количествено проламиновите пептидни фрагменти от пшеница (глиадин), ръж (секалин) и ечемик (хордеин). Използваните R5 моноклонални антитела разпознават измежду другите потенциално токсичната последователност QQPFP, която възниква в проламиновите молекули.
Всички реагенти, необходими за ензимния имуноанализ - включително стандартите - се съдържат в тестовия комплект.
Само за инвитро употреба.
Обща информация:
Употребата на пшенично брашно и глутен в хранителни продукти е изключително често срещано, поради тяхната термична стабилност и полезни ефекти, например върху текстурата, влагата и вкуса. Глутенът е смес от проламинови и глутелинови протеини, налични в пшеницата, ръжта и ечемика.
Съгласно Codex Alimentarius (CODEX STAN 118/1979) съществуват две категории за етикетиране, според съдържането на глутен в хранителните продукти:
1) Хранителни продукти, които съдържат по-малко от 20 mg/kg, могат да бъдат отбелязвани като „безглутенови”.
2) Хранителни продукти, които съдържат глутен от 20 до 100 mg/kg, се класифицират с „ниско съдържание на глутен”.
По време на преработването на храна, като например при ферментация или хидролиза, целите проламинови молекули са частично или изцяло разпаднати до малки пептидни фрагменти. За пациенти с целиакия, тези фрагменти остават опасни дори след усвояването им в стомаха.
Единична, малка пептидна последователност (мотив) не може да бъде детектирана с ELISA анализ тип сандвич, защото са необходими поне два епитопа за този метод. От друга страна, с конкурентния ензимен имуноанализ единичните пептидни фрагменти могат да бъдат детектирани. RIDASCREEN® Gliadin competitive съдържа нов стандартен материал, като за това пшеницата, ръжта и ечемикът са разградени чрез пепсин и трипсин, и пептидните фрагменти са смесени и лиофилизирани след определянето на протеина. Протеиновото съдържание е определено спрямо Dumas.
Анализът може да бъде свързан с проламиновата концентрация и следователно с граничните стойности, предвидени от Codex Alimentarius. Резултатът е представен в mg/kg (ppm) глиадин. Хидролизираният стандарт е продуциран чрез работната група на проф. д-р Köhler (Германски изследователски център за химия на храните).
RIDASCREEN® Gliadin competitive е одобрен от:
- TTB номер на постановление 2012-2 за бира
- AOECS стандарт R5 ELISA за хидролизирани храни
- MEBAK метод 2.6.5 анализ на бира
Тест формат: Микротитърна плака с 96 ямки (12 стрипа с 8 чупещи се ямки)
Стандартна крива: 0 ng/mL (нулев стандарт), 10 ng/mL, 30 ng/mL, 90 ng/mL, 270 ng/mL глиадин.
Пробоподготовка: хомогенизация и екстракция
Време за инкубация: 40 минути
Лимит на детекция: 2.3 mg/kg (ppm) глиадин или 4.6 mg/kg (ppm) глутен
Лимит на количествено определяне: 5 mg/kg (ppm) глиадин или 10 mg/kg (ppm) глутен
Специфичност: Моноклоналните антитела R5 реагират с потенциално токсичната пептидна последователност от глиадин от пшеница и кореспондират с проламините от ръжта и ечемика.
YouTube - Тест процедура за анализ на глутен с RIDASCREEN® Gliadin competitive