ОБЩА ИНФОРМАЦИЯ

COVID-19 се причинява от тежък остър респираторен синдром коронавирус 2 (SARS-CoV-2), който за първи път е идентифициран след поредица от респираторни заболявания в град Ухан, провинция Хубей, Китай и оттогава е причинил глобална пандемия. SARS-CoV-2 е едноверижен РНК вирус с положителна полярност и принадлежи към рода на Betacoronavirus, който също включва SARS CoV (2003) и MERS CoV (2012). Подобно на всички други коронавируси, геномът на SARS-CoV-2 (2019-nCoV) кодира протеина Spike / RBD, протеина на обвивката, мембранния протеин и нуклеокапсидния протеин или NCP.

Докато антителата срещу NCP са първите, които се появяват при сероконверсия, антителата срещу Spike / RBD, участващи в свързването с ACE2 рецептора, се произвеждат по-късно по време на инфекцията, считат се за маркер за възстановяване и е известно, че имат неутрализиращ ефект върху SARS-CoV -2 чрез блокиране на свързването на вируса с ACE2 рецептора.

ACE2-RBD Neutralization Assay е ELISA кит, използван за определяне на неутрализиращата активност на антитела срещу SARS-CoV-2 чрез инхибиране на свързването на ACE2-RBD в човешки серум и плазма.

ПРИНЦИП НА ТЕСТА

Микроплаките са покрити със специфичен за SARS-CoV-2 рекомбинантен гликозилиран RBD. Пробата се инкубира, позволявайки на анти Spike / RBD антителата, ако има такива, да се свържат с такъв антиген. След измиване, свободните Spike / RBD се определят чрез добавяне на рекомбинантен ACE2 биотинилиран антиген и след това в последователност от SAV-HRP.

Цвят ще се генерира от TMB / H2O2, ако няма антитела, които са се свързали с RBD. В контраст, силно инхибиране на развитието на цвета ще се наблюдава, в случай че антителата срещу RBD са блокирали свързването на белязания с биотин ACE2 към него. Наличието на такъв антиген върху твърдата фаза се определя най-накрая, чрез добавянето на SAV-HRP, който ще се свърже с ACE2, ако няма неутрализиращи антитела или няма да се свърже, в случай че антителата са блокирали покрития RBD.

В случай, че пробата се разрежда последователно в анализа, може да се изчисли титър от системата, осигуряваща стойност на неутрализация.

МАТЕРИАЛИ И РЕАГЕНТИ

• Микроплака
• Отрицателна контрола
• Положителна контрола
• ACE2-биотин
• Streptavidin-HRP
• Разтворител за анализ
• Хромоген/субстрат
• Измивен буфер
• Сярна киселина
• Запечатващо фолио
• Листовка

ЕФЕКТИВНОСТ:

Анализът показва корелация с ELISA на DiaPro за анти Spike / RBD антитела върху положителни проби > 98%.

Китът е предназначен само за ин витро диагностична употреба.